一、内容总结
本培训资料系统介绍了血液学检验基础知识及雅培Cell-Dyn系列血液分析仪的技术原理。
血液基本功能:运输氧气、营养物质、激素和酶;参与体液调节与内环境稳定;防御细菌毒素;凝血防止血液流失。血液三大细胞成分为白细胞(免疫防御)、红细胞(氧运输)和血小板(凝血)。
白细胞分类:五分类包括中性粒细胞(分叶核、吞噬细胞)、淋巴细胞(T/B/NK细胞,参与免疫应答)、单核细胞(巨噬细胞前体)、嗜酸性粒细胞(寄生虫感染相关)、嗜碱性粒细胞(含嗜碱性颗粒,比例最少)。
红细胞:正常值4.0-6.0M/µl,寿命120天,含血红蛋白和铁,在骨髓中形成,低氧刺激肾脏释放促红细胞生成素。成熟过程:原始红细胞→早幼红细胞→中幼红细胞→晚幼红细胞→网织红细胞→成熟红细胞。网织红细胞是成熟前最后阶段,反映骨髓造血功能。
主流五分类技术:①多角度激光偏振光散射检测法(MAPSS,雅培代表);②阻抗+激光散射+荧光染色(Sysmex代表);③电阻抗+射频电导联合检测(Beckman-Coulter代表)。
MAPSS技术核心:四个角度激光散射检测——0°测细胞大小,10°测细胞复杂性和核质比,90°测核分叶性,90°偏振测颗粒性(嗜酸性粒细胞使偏振光消偏振,为雅培核心专利)。采用液流聚焦技术,单个细胞通过激光检测器,分析10,000-20,000个细胞。
雅培产品线:Ruby(全光学MAPSS技术,3种试剂完成五分类,4种模式,速度≥84样本/h);Sapphire(MAPSSplus+三色荧光,可做CD61免疫血小板、CD3/4/8淋巴细胞亚型,36参数+18散点图);3700(WIC/WOC双通道白细胞计数,电阻抗法RBC/PLT)。
HEH高效血液学系统:仪器(一次性出准确结果)+中间件IM(自动化验证)+标本管理系统PF350S+人员优化,四部分协同工作。
干扰与报警:常见干扰包括NRBC(有核红细胞)、FWBC/nvWBC(脆性白细胞)、RRBC/RstRBC(难溶性红细胞)、PltClmp(血小板凝块)等,均可在散点图上识别。
二、常见问题
问题1:血液的三大细胞成分是什么?各有哪些主要功能?
答案:血液三大细胞成分为:
| 细胞类型 |
主要功能 |
| 白细胞(Leukocytes) |
免疫防御,消灭入侵细菌和毒素;参与体液及细胞免疫应答 |
| 红细胞(Erythrocytes) |
运输血红蛋白、氧气和二氧化碳;参与体液调节,维持内环境稳定 |
| 血小板(Thrombocytes) |
凝血,预防流血;释放血小板颗粒,形成血纤维蛋白 |
红细胞正常值4.0-6.0M/µl,寿命120天;血小板正常值200K-500K/µl,寿命约10天,大小2-6微米,形状不规则,是巨核细胞的碎片。
问题2:请详细描述MAPSS技术的检测原理和四个角度的意义。
答案:MAPSS(多角度激光偏振光散射检测法)是雅培的核心专利技术,采用488nm激光光源。
技术要点:
-
细胞稀释悬液通过液流聚焦技术( hydrodynamic focusing),确保细胞在检测区域中心点单个通过
-
每个细胞收集4个不同角度散射光数据
-
每次分析10,000-20,000个细胞(优于Sysmex的8000个)
四个角度及其意义:
| 角度 |
检测内容 |
临床意义 |
| 0° |
细胞大小 |
区分淋巴细胞与单核细胞 |
| 10° |
细胞复杂性和核质比 |
区分单核细胞与分叶核细胞 |
| 90° |
细胞核分叶性 |
区分单个核细胞与分叶核细胞 |
| 90°偏振 |
细胞颗粒性 |
区分嗜酸性粒细胞(使偏振光消偏振)与中性粒细胞 |
这是雅培核心专利,嗜酸性粒细胞的颗粒具有使偏振光消偏振的物理特性。
问题3:雅培Cell-Dyn Ruby和Sapphire的主要技术区别是什么?
答案:
| 对比项 |
Ruby |
Sapphire |
| 核心技术 |
MAPSS全光学技术 |
MAPSSplus + 三色荧光技术 |
| 激光 |
单激光 |
488nm蓝色半导体激光 |
| 分析细胞数 |
10,000-20,000 |
最多20,000个 |
| 检测速度 |
≥84样本/小时 |
106样本/小时 |
| 参数 |
25项 + 10直方图 + 8散点图 |
36项 + 18个散点图 |
| 试剂种类 |
3种(五分类),加网织红共4种 |
支持荧光试剂 |
| 血小板技术 |
光学PLT直接给出 |
光学+阻抗法同时进行+CD61免疫血小板 |
| 特殊功能 |
- |
CD3/CD4/CD8淋巴细胞亚型分型,单克隆分析 |
| 网织红细胞 |
半自动模式 |
全自动模式 |
| NRBC |
报警提示 |
全自动计数 |
Sapphire在MAPSS基础上增加了荧光检测能力(FL1/FL2/FL3通道),可进行DNA/RNA染色分析。
问题4:白细胞五分类包括哪些细胞?各有什么形态和临床特征?
答案:白细胞五分类包括:
| 细胞类型 |
形态特征 |
临床意义 |
| 中性粒细胞 |
分叶状核(通常5个分叶),高度游走的吞噬细胞 |
细菌感染时增多 |
| 淋巴细胞 |
含T/B/NK细胞,表面有CD决定簇 |
参与体液及细胞免疫应答,与病毒感染相关 |
| 单核细胞 |
巨噬细胞及外周组织大型吞噬细胞的前体 |
吞噬作用 |
| 嗜酸性粒细胞 |
细胞质内含大的集中嗜碱性颗粒 |
寄生虫感染、过敏性疾病时增多 |
| 嗜碱性粒细胞 |
白细胞中比例最少,细胞质内含大的集中嗜碱性颗粒 |
过敏反应相关 |
问题5:网织红细胞是什么?其临床意义是什么?
答案:网织红细胞是红细胞成熟过程中离开骨髓前的最后一个阶段,是未完全成熟的红细胞。
成熟过程:原始红细胞→早幼红细胞→中幼红细胞→晚幼红细胞→网织红细胞→成熟红细胞
临床意义:
在雅培Ruby上,网织红细胞采用半自动模式检测,使用新美兰(NMB)染色;Sapphire上为全自动模式。
问题6:血液分析中常见的干扰因素有哪些?如何在散点图上识别?
答案:常见干扰因素及其在散点图上的表现:
| 干扰代码 |
全称 |
含义 |
影响的测定 |
| NWBC |
Non-WBC |
非白细胞干扰(碎片等) |
WBC计数和分类 |
| NRBC |
Nucleated RBC |
有核红细胞 |
WBC计数(被误计为白细胞) |
| FWBC/nvWBC |
Fragile/Nonviable WBC |
脆性/死亡白细胞 |
WBC计数和分类 |
| RRBC/RstRBC |
Resistant RBC |
难溶性红细胞(肝病、孕妇常见) |
WBC计数 |
| PltClmp |
Platelet Clump |
血小板凝块 |
血小板计数 |
| FP? |
Fluorescence Positive? |
可疑荧光阳性(Sapphire) |
WBC计数和分类 |
| ASYM |
Asymmetry |
红细胞不对称分布 |
RBC参数 |
识别方法:通过查看大小/复杂度散点图、大小/核分叶性散点图、NWBC/Lym/Mono柱状图以及FL3通道散点图(Sapphire)来综合判断干扰来源。
问题7:雅培HEH(高效血液学系统)包含哪四个组成部分?如何提高实验室效率?
答案:HEH包含四个组成部分:
| 组成部分 |
具体内容 |
作用 |
| 1. 血液分析仪 |
Cell-Dyn系列(Ruby/Sapphire等) |
上样后一次性出准确结果,复检率低(约5%) |
| 2. 中间件(IM) |
Instrument Manager |
自动化验证结果,减少复检,优化信息处理,提高报告周转时间 |
| 3. 标本管理系统 |
PathFinder 350S |
分析前后配置标准化,优化标本管理流程 |
| 4. 人 |
实验室专业人员 |
最有效利用实验室最有价值的资源,集中专业知识在最需要之处 |
效率提升路径:
四部分协同工作,实现高效率+低成本,让血液检测高效流畅。
问题8:主流五分类血液分析仪有哪几种技术原理?各有什么代表性产品?
答案:三种主流五分类技术:
| 技术 |
检测原理 |
代表性产品 |
特点 |
| 多角度激光偏振光散射检测法(MAPSS) |
四个角度(0°/10°/90°/90°偏振)激光散射,液流聚焦 |
雅培Cell-Dyn系列(Ruby/Sapphire/3700) |
核心专利为90°偏振区分嗜酸性粒细胞;全光学技术,3-4种试剂完成五分类+网织红 |
| 阻抗+激光散射+荧光染色 |
电阻抗法测体积 + 激光散射测形态 + 荧光染DNA/RNA |
Sysmex系列 |
需较多试剂(五分类9种以上,加网织红11种),复检率约30% |
| 电阻抗+射频电导联合检测 |
电阻抗测细胞大小 + 射频电导测细胞内部结构 |
Beckman-Coulter系列 |
利用细胞通过高频电流时电导率差异进行区分 |
雅培技术优势:采用MAPSS技术分析10,000-20,000个细胞(优于Sysmex的8000个),试剂种类最少(3种试剂完成五分类),手工复检率最低(约5%,Sysmex约30%),对低值血小板CV达20%(阻抗法约30%或更高)。 |